编辑推荐
《干细胞实验指南》是进行干细胞研究的实验技术类书籍。干细胞研究日新月异，推出一本既能体现目前干细胞技术的领先水平，又对科研人员的具体实验操作有实际指导作用的图书是我们的初衷。
作者简介
周琪，主要从事细胞重编程机制、干细胞与再生医学等研究与转化工作。国际首次获得体细胞克隆大鼠、iPSC小鼠，建立了孤雌胚胎干细胞、单倍体胚胎干细胞等多种新型多能性干细胞系，获得单倍体胚胎干细胞来源的转基因小鼠和大鼠，发现可以判断干细胞多能性水平的分子标识并揭示其调控机制，揭示mRNA甲基化修饰在调节细胞重编程中的作用，建立了包括灵长类动物在内的多种人类疾病动物模型，推动建立了国际干细胞临床标准和临床级胚胎干细胞库等。成果曾入选美国《时代周刊》评选的年度医学十大突破，其本人及其团队的3项成果先后分别入选中国十大科技新闻人物／中国基础研究十大新闻／两院院士评选的十大科技进展／中国科学十大进展；获得第三届genOway国际转基因技术奖、2010年度何梁何利基金科学与技术进步奖、2014年度国家自然科学二等奖等奖项。
目录
第一章干细胞概述
一、干细胞的定义与特性
二、干细胞的分类
三、干细胞的研究历史及热点
参考文献
第二章干细胞培养技术概述
第一节概述
一、细胞培养的优势
二、细胞培养的限制
三、细胞培养的应用
四、细胞培养的基本条件
五、细胞培养的无菌原则
六、细胞实验的注意事项
七、细胞培养液的成分及配制
第二节干细胞常用培养方法
一、细胞培养方式
二、原代取材
三、传代培养
第三节干细胞的冻存与复苏
一、细胞的冻存
二、细胞复苏的过程
第四节细胞污染的检测与鉴定
一、细胞污染
二、细胞污染的预防
第五节干细胞鉴定方法
一、细胞形态观察
二、核型分析
三、免疫组织化学／荧光染色
四、分子水平分析
五、流式细胞分析
六、细胞亚群分析
七、绘制细胞增殖曲线
八、细胞凋亡检测
第六节细胞的保存与运输
一、细胞保存原则
二、细胞运输原则
参考文献
第三章胚胎干细胞
第一节概述
第二节小鼠胚胎干细胞
一、小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层细胞的制备
二、小鼠胚胎干细胞建系
三、小鼠胚胎干细胞传代、冻存及复苏
四、小鼠胚胎干细胞的鉴定
第三节人胚胎干细胞
一、人胚胎干细胞的分离及建系
二、人胚胎干细胞传代、冻存及复苏
三、人胚胎干细胞的鉴定
第四节非人灵长类胚胎干细胞分离及建系方法
一、引言
二、饲养层细胞的制备
三、猴胚胎干细胞的分离及建系
四、猴胚胎干细胞传代、冻存及复苏
五、猴胚胎干细胞的鉴定
参考文献
第四章诱导性多能干细胞
第一节概述
第二节小鼠诱导性多能干细胞
一、小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层的制备
二、反转录病毒的制备及感染
三、小鼠诱导性多能干细胞诱导及建系
四、小鼠诱导性多能干细胞的传代、冻存和复苏
五、小鼠诱导性多能干细胞的鉴定
第三节人诱导性多能干细胞系
一、引言
二、反转录病毒制备
三、供体细胞的取材
四、人诱导性多能干细胞诱导
五、人诱导性多能干细胞传代、冻存及复苏
六、人诱导性多能干细胞的鉴定
参考文献
第五章神经干细胞
第一节概述
一、神经干细胞的来源和特性
二、神经干细胞的应用
第二节神经干细胞的分离、纯化及建系培养
一、分离室管膜下区
二、神经干细胞的分离和纯化
三、流式染色
四、流式分析及收集
五、神经干细胞建系培养
第三节小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化及神经干细胞的定向分化
一、小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化
二、小鼠神经干细胞的定向分化
第四节人胚胎干细胞分化成神经前体细胞和多巴胺能神经元
第五节神经元的电生理检测过程
第六节小鼠成纤维细胞向神经干细胞的定向转分化
参考文献
第六章造血干细胞
第一节造血干细胞的概述
第二节造血干细胞分离和扩增
一、引言
二、重要概念与基本方法
三、单个核细胞的分离
四、CD34+细胞分选
五、CD34+细胞的扩增
六、造血干细胞冻存和复苏
第三节造血干细胞的鉴定
一、流式细胞仪检测CD34+细胞比率
二、集落形成单位鉴定
三、长期培养检测法（LTC—IC）
参考文献
第七章间充质干细胞
第一节概述
一、引言
二、间充质干细胞的来源和鉴定
三、间充质干细胞的特性
四、间充质干细胞的研究进展和临床应用
第二节骨髓间充质干细胞
一、骨髓间充质干细胞的原代取材
二、骨髓间充质干细胞的传代、冻存和复苏
第三节人脐带间充质干细胞
一、脐带间充质干细胞的原代取材
二、脐带间充质干细胞的传代、冻存和复苏
第四节脂肪间充质干细胞
一、脂肪间充质干细胞的原代取材
二、脂肪间充质干细胞的传代、冻存和复苏
第五节间充质干细胞的鉴定
一、形态观察
二、CD分子的检测
三、体外分化及鉴定
参考文献
第八章精原干细胞
第一节概述
第二节小鼠精原干细胞分离培养
第三节小鼠精原干细胞的鉴定与移植
一、小鼠精原干细胞免疫荧光鉴定
二、小鼠精原干细胞移植
参考文献
第九章干细胞实验室的建设
一、基础设施建设
二、细胞培养的洁净问
三、仪器设备
四、《药品生产质量管理规范》
参考文献
附录
附录一缩略语
附录二溶液的配制
一、细胞培养相关溶液的配制
二、动物实验相关溶液的配制
三、胚胎操作相关溶液的配制
四、免疫组织化学染色和流式分选相关溶液的配制
五、分子生物学实验相关溶液的配制
六、分离神经干细胞的相关溶液的配制
附录三引物
附录四试剂
附录五耗材
附录六仪器
索引
文摘
版权页：
插图：
造血干细胞（HSCs）是迄今为止研究最为透彻的成体干细胞。1961年Till和McCulloch等在分析骨髓中负责血液再生的细胞时用了两个特征来定义HSCs（Till and McCulloch，1961），一是可以进行自我更新，二是可以产生所有血细胞类型。经过近50多年的研究，随着对HSCs的了解不断深入，HSCs可以从骨髓、脐带血和动员后的外周血中分离获得。HSCs较早应用于临床，用于治疗癌症、血液疾病以及一些免疫系统疾病。另外，HSCs还具有转分化成神经细胞、肌肉细胞以及肝细胞等细胞的能力（Wagersand Weissman，2004）。因此与其他成体干细胞相比，HSCs具有不可比拟的优势。
HSCs在体内需要保证机体血液供应、维持内环境稳态以及在紧急出血或机体受到损害的情况下快速产生大量成熟的血细胞，因此HSCs需具备以下功能（Morrison and Kimble，2006）：可自我更新或凋亡以维持自身的数量稳定；可迅速进入分化状态形成血细胞；可迁移至身体其他部位；可维持自身在骨髓中的内环境稳态。所以HSCs最主要的特征就是自我更新以及具有多向分化成所有血细胞类型的潜能。检验小鼠HSCs的黄金标准是把细胞注射到接受过一定射线照射后自身造血细胞被全部杀死的小鼠中，重建小鼠的造血系统。验证人HSCs的功能则需要将其移植到造血系统被射线破坏的非肥胖糖尿病／重症联合免疫缺陷小鼠（Nonobese Diabetic／Severle Combined Immunodeficient Mice，NOD／SCID小鼠， 即在SCID小鼠的基础上与NOD／Lt品系回交的免疫缺陷鼠）中，检测其是否能够恢复小鼠的造血功能（Blank et al.2008）。
《干细胞实验指南》是进行干细胞研究的实验技术类书籍。干细胞研究日新月异，推出一本既能体现目前干细胞技术的领先水平，又对科研人员的具体实验操作有实际指导作用的图书是我们的初衷。
作者简介
周琪，主要从事细胞重编程机制、干细胞与再生医学等研究与转化工作。国际首次获得体细胞克隆大鼠、iPSC小鼠，建立了孤雌胚胎干细胞、单倍体胚胎干细胞等多种新型多能性干细胞系，获得单倍体胚胎干细胞来源的转基因小鼠和大鼠，发现可以判断干细胞多能性水平的分子标识并揭示其调控机制，揭示mRNA甲基化修饰在调节细胞重编程中的作用，建立了包括灵长类动物在内的多种人类疾病动物模型，推动建立了国际干细胞临床标准和临床级胚胎干细胞库等。成果曾入选美国《时代周刊》评选的年度医学十大突破，其本人及其团队的3项成果先后分别入选中国十大科技新闻人物／中国基础研究十大新闻／两院院士评选的十大科技进展／中国科学十大进展；获得第三届genOway国际转基因技术奖、2010年度何梁何利基金科学与技术进步奖、2014年度国家自然科学二等奖等奖项。
目录
第一章干细胞概述
一、干细胞的定义与特性
二、干细胞的分类
三、干细胞的研究历史及热点
参考文献
第二章干细胞培养技术概述
第一节概述
一、细胞培养的优势
二、细胞培养的限制
三、细胞培养的应用
四、细胞培养的基本条件
五、细胞培养的无菌原则
六、细胞实验的注意事项
七、细胞培养液的成分及配制
第二节干细胞常用培养方法
一、细胞培养方式
二、原代取材
三、传代培养
第三节干细胞的冻存与复苏
一、细胞的冻存
二、细胞复苏的过程
第四节细胞污染的检测与鉴定
一、细胞污染
二、细胞污染的预防
第五节干细胞鉴定方法
一、细胞形态观察
二、核型分析
三、免疫组织化学／荧光染色
四、分子水平分析
五、流式细胞分析
六、细胞亚群分析
七、绘制细胞增殖曲线
八、细胞凋亡检测
第六节细胞的保存与运输
一、细胞保存原则
二、细胞运输原则
参考文献
第三章胚胎干细胞
第一节概述
第二节小鼠胚胎干细胞
一、小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层细胞的制备
二、小鼠胚胎干细胞建系
三、小鼠胚胎干细胞传代、冻存及复苏
四、小鼠胚胎干细胞的鉴定
第三节人胚胎干细胞
一、人胚胎干细胞的分离及建系
二、人胚胎干细胞传代、冻存及复苏
三、人胚胎干细胞的鉴定
第四节非人灵长类胚胎干细胞分离及建系方法
一、引言
二、饲养层细胞的制备
三、猴胚胎干细胞的分离及建系
四、猴胚胎干细胞传代、冻存及复苏
五、猴胚胎干细胞的鉴定
参考文献
第四章诱导性多能干细胞
第一节概述
第二节小鼠诱导性多能干细胞
一、小鼠胚胎成纤维细胞的原代培养及饲养层的制备
二、反转录病毒的制备及感染
三、小鼠诱导性多能干细胞诱导及建系
四、小鼠诱导性多能干细胞的传代、冻存和复苏
五、小鼠诱导性多能干细胞的鉴定
第三节人诱导性多能干细胞系
一、引言
二、反转录病毒制备
三、供体细胞的取材
四、人诱导性多能干细胞诱导
五、人诱导性多能干细胞传代、冻存及复苏
六、人诱导性多能干细胞的鉴定
参考文献
第五章神经干细胞
第一节概述
一、神经干细胞的来源和特性
二、神经干细胞的应用
第二节神经干细胞的分离、纯化及建系培养
一、分离室管膜下区
二、神经干细胞的分离和纯化
三、流式染色
四、流式分析及收集
五、神经干细胞建系培养
第三节小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化及神经干细胞的定向分化
一、小鼠胚胎干细胞向神经干细胞的定向诱导分化
二、小鼠神经干细胞的定向分化
第四节人胚胎干细胞分化成神经前体细胞和多巴胺能神经元
第五节神经元的电生理检测过程
第六节小鼠成纤维细胞向神经干细胞的定向转分化
参考文献
第六章造血干细胞
第一节造血干细胞的概述
第二节造血干细胞分离和扩增
一、引言
二、重要概念与基本方法
三、单个核细胞的分离
四、CD34+细胞分选
五、CD34+细胞的扩增
六、造血干细胞冻存和复苏
第三节造血干细胞的鉴定
一、流式细胞仪检测CD34+细胞比率
二、集落形成单位鉴定
三、长期培养检测法（LTC—IC）
参考文献
第七章间充质干细胞
第一节概述
一、引言
二、间充质干细胞的来源和鉴定
三、间充质干细胞的特性
四、间充质干细胞的研究进展和临床应用
第二节骨髓间充质干细胞
一、骨髓间充质干细胞的原代取材
二、骨髓间充质干细胞的传代、冻存和复苏
第三节人脐带间充质干细胞
一、脐带间充质干细胞的原代取材
二、脐带间充质干细胞的传代、冻存和复苏
第四节脂肪间充质干细胞
一、脂肪间充质干细胞的原代取材
二、脂肪间充质干细胞的传代、冻存和复苏
第五节间充质干细胞的鉴定
一、形态观察
二、CD分子的检测
三、体外分化及鉴定
参考文献
第八章精原干细胞
第一节概述
第二节小鼠精原干细胞分离培养
第三节小鼠精原干细胞的鉴定与移植
一、小鼠精原干细胞免疫荧光鉴定
二、小鼠精原干细胞移植
参考文献
第九章干细胞实验室的建设
一、基础设施建设
二、细胞培养的洁净问
三、仪器设备
四、《药品生产质量管理规范》
参考文献
附录
附录一缩略语
附录二溶液的配制
一、细胞培养相关溶液的配制
二、动物实验相关溶液的配制
三、胚胎操作相关溶液的配制
四、免疫组织化学染色和流式分选相关溶液的配制
五、分子生物学实验相关溶液的配制
六、分离神经干细胞的相关溶液的配制
附录三引物
附录四试剂
附录五耗材
附录六仪器
索引
文摘
版权页：
插图：
造血干细胞（HSCs）是迄今为止研究最为透彻的成体干细胞。1961年Till和McCulloch等在分析骨髓中负责血液再生的细胞时用了两个特征来定义HSCs（Till and McCulloch，1961），一是可以进行自我更新，二是可以产生所有血细胞类型。经过近50多年的研究，随着对HSCs的了解不断深入，HSCs可以从骨髓、脐带血和动员后的外周血中分离获得。HSCs较早应用于临床，用于治疗癌症、血液疾病以及一些免疫系统疾病。另外，HSCs还具有转分化成神经细胞、肌肉细胞以及肝细胞等细胞的能力（Wagersand Weissman，2004）。因此与其他成体干细胞相比，HSCs具有不可比拟的优势。
HSCs在体内需要保证机体血液供应、维持内环境稳态以及在紧急出血或机体受到损害的情况下快速产生大量成熟的血细胞，因此HSCs需具备以下功能（Morrison and Kimble，2006）：可自我更新或凋亡以维持自身的数量稳定；可迅速进入分化状态形成血细胞；可迁移至身体其他部位；可维持自身在骨髓中的内环境稳态。所以HSCs最主要的特征就是自我更新以及具有多向分化成所有血细胞类型的潜能。检验小鼠HSCs的黄金标准是把细胞注射到接受过一定射线照射后自身造血细胞被全部杀死的小鼠中，重建小鼠的造血系统。验证人HSCs的功能则需要将其移植到造血系统被射线破坏的非肥胖糖尿病／重症联合免疫缺陷小鼠（Nonobese Diabetic／Severle Combined Immunodeficient Mice，NOD／SCID小鼠， 即在SCID小鼠的基础上与NOD／Lt品系回交的免疫缺陷鼠）中，检测其是否能够恢复小鼠的造血功能（Blank et al.2008）。
| ISBN | 9787304071868,7304071869 |
|---|---|
| 出版社 | 中央广播电视大学出版社 |
| 作者 | 周琪 |
| 尺寸 | 16 |