全国高等院校医学实验教学规划教材:生物化学与分子生物学实验教程(第2版) 9787030472694

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《全国高等院校医学实验教学规划教材:生物化学与分子生物学实验教程(第2版)》可供高等医学院校本科生和研究生教材使用,也可供有关的教学及科技人员参考使用。

目录

第一章生物化学常用分析技术
第一节生物大分子的基本制备技术
第二节分光光度法
第三节层析技术
第四节电泳技术
第二章蛋白质分子组成与理化性质分析
第一节蛋白质的分子组成与结构
第二节蛋白质的分离和纯化
第三节蛋白质的定量
第四节蛋白质相对分子量测定
第五节实验项目
实验一蛋白质的定量测定
实验二血清蛋白质的层析分离
实验三血清蛋白质的电泳分离
实验四蛋白质理化性质分析
实验五固定化蛋白质的免疫生化鉴定(Western Blot)
第三章核酸的分子组成及理化性质分析
第一节核酸的分子组成与结构
第二节核酸的理化性质
第三节核酸的制备和含量测定
第四节实验项目
实验六真核生物基因组DNA的制备(苯酚法)
实验七人外周血白细胞DNA的制备
实验八DNA与RNA含量测定
实验九琼脂糖凝胶电泳分离DNA
第四章酶作用及酶促反应动力学
第一节酶的分子结构和功能
第二节酶促反应动力学
第三节酶活性测定
第四节实验项目
实验十淀粉酶的特异性及温度、pH对淀粉酶活性的影响
实验十一碱性磷酸酶的提纯及比活性的测定
实验十二碱性磷酸酶的Km测定
实验十三磷酸盐对碱性磷酸酶的抑制作用
实验十四温度和pH对碱性磷酸酶活性的影响
实验十五乳酸脱氢酶同工酶分析
第五章物质代谢及其激素调节
第一节物质代谢定义
第二节物质代谢的研究方法
第三节实验项目
实验十六血清葡萄糖的测定
实验十七胰岛素和肾上腺素对血糖浓度的影响
实验十八肝糖原的提取和鉴定
实验十九生物氧化中酶的催化作用
实验二十血浆高密度脂蛋白—胆固醇含量的测定
实验二十一磷脂的提取及其薄板层析
实验二十二酮体的生成与作用
实验二十三血清丙氨酸转氨酶活性的测定(改良赖氏法)
实验二十四纸层析法鉴定转氨酶的转氨基作用
第六章分子生物学基本实验技术
第一节基因工程基本技术
第二节聚合酶链反应
第三节核酸分子杂交
第四节DNA测序技术
第五节实验项目
实验二十五动物组织总RNA的提取
实验二十六聚合酶链反应(PCR)技术体外扩增DNA
实验二十七逆转录聚合酶链反应(RT—PCR)
实验二十八质粒DNA的制备
实验二十九限制性内切酶酶切
实验三十目的DNA片段的分离和纯化
实验三十一DNA片段与载体的连接
实验三十二感受态细菌的制备(化学法)
实验三十三质粒DNA的转化
实验三十四重组质粒的筛选
买验三十五Southern blot(印迹)
实验三十六外源基因的原核表达
实验三十七外源基因在真核生物中的表达
附录
附录一常用缓冲溶液的配制
附录二常用蛋白质相对分子质量及等电点
附录三色谱法常用数据
附录四离心转数和离心力的换算
附录五实验数据和数据处理

文摘

版权页:

插图:

4.报告基因 报告基因是某种生物的特定基因,装配在载体上成为载体结构的一部分,具有指示的功能。与抗药性基因相比,报告基因作为筛选方法有更高的灵敏度和准确性,在基因工程中的重要性要大得多。
报告基因的表达产物易被检测,因为受体细胞本身没有这种内源性产物。通过陕速测定,“报告”外源基因是否已经重组到载体中,判断外源基因是否已成功地导人宿主细胞或是否表达。如绿色荧光蛋白报告基因表达的产物绿色荧光蛋白(GFP),在激发光源下显示为绿色,可以直接在荧光显微镜下观测。因此报告基因产物常作为直接观察载体活动的指示分子。
(六)目的蛋白在宿主细胞中的表达
经过上述过程可以获得特异序列的重组DNA分子,即基因克隆。然而使目的基因在宿主细胞体内进行表达,实现科学研究、医学或商业的目的才是基因工程的最终目标。因此就需要利用表达载体使目的基因在原核或者真核表达体系中表达目的基因的产物。在蛋白质表达领域,表达体系的建立包括表达载体的构建、受体细胞的建立以及表达产物的分离、纯化等技术和策略。
ISBN9787030472694
出版社科学出版社
作者徐跃飞
尺寸16