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《基因工程原理与技术》为作者长期从事《基因工程原理》课程教学的经验的总结。通过本书的学习，学生能更加深刻地理解基因工程各种理论知识，并能在实验过程中知道为什么要这样做，如何去做。
作者简介
韦宇拓，广西大学生命科学与技术学院微生物学副教授，博士，硕士生导师。主要从事基因工程菌的构建、生物产品的开发研究、蛋白酶分子进化、微生物生物技术等方面的教学和研究。
目录
第一章基因工程实验室基本要求和常规仪器设备
第一节实验室安全和基本环境要求
第二节实验室常规仪器和设备
第三节实验室灭菌、消毒技术
第二章核酸电泳技术
第一节核酸电泳的原理
第二节影响核酸电泳的因素
第三节核酸的检测方法
第四节核酸琼脂糖凝胶电泳
第五节聚丙烯酰胺凝胶电泳
第三章核酸工具酶
第一节限制性核酸内切酶
第二节连接酶
第三节DNA聚合酶
第四节DNA修饰酶
第五节核酸酶
第四章核酸的分离纯化
第一节核酸分离纯化的基本知识
第二节核酸分离纯化的基本原则
第五章PCR的原理和应用
第一节PCR技术的原理
第二节PCR反应系统
第三节PCR常规技术及其延伸技术
第四节实时荧光定量PCR
第六章基因工程常用载体
第一节基因工程载体的概述
第二节质粒载体
第三节λ噬菌体载体
第四节噬菌粒载体
第五节柯斯质粒载体
第七章目的基因的克隆
第一节目的基因的克隆策略
第二节基因组文库的构建
第三节cDNA文库的构建
第四节核酸探针的制备
第八章重组子的构建、转化和筛选
第一节连接方式
第二节重组子的构建策略
第三节重组子导入受体细胞
第四节重组子的筛选方法
第九章大肠杆菌表达系统
第一节基因表达系统概述
第二节大肠杆菌表达系统的主要表达元件
第三节常见的大肠杆菌表达系统
第四节外源基因在大肠杆菌中表达的主要影响因素
第十章酵母表达系统
第一节酵母表达系统的发展
第二节酵母的克隆载体类型
第三节酵母表达系统主要构成要素
第四节常用的酵母表达系统
第五节外源基因在酵母中表达的基本策略
主要参考文献
文摘
版权页：
插图：
有研究表明，大多数不稳定的重组外源蛋白是被大肠杆菌中的lon和clp基因编码的蛋白酶La和Ti降解的，其蛋白水解活性依赖于ATP。lon基因由热休克等环境压力激活，细胞内异常蛋白或重组外源蛋白的过量表达也可作为一种环境压力诱导lon基因的表达。lon基因缺失的大肠杆菌突变株可使原来半衰期较短的细菌调控蛋白（如SulA、RscA、λN等）稳定性大增，因此被广泛用作外源基因高效表达的菌株。此外，大肠杆菌中庞大的热休克蛋白家族对异常或异源蛋白的降解也有重要作用，其机理是它能胁迫异常或外源蛋白形成一种对蛋白酶识别和降解的有利空间构象，从而提高异常或外源蛋白对蛋白酶的敏感性。热休克基因dnaK、dnaJ、groEL、grpE以及环境压力特异性σ因子编码基因htpR缺失的突变株均呈现出对异源蛋白降解作用的严重缺陷，特别是lon—htpR—的双缺陷株，非常适合高效表达各种不稳定的重组外源蛋白。
《基因工程原理与技术》为作者长期从事《基因工程原理》课程教学的经验的总结。通过本书的学习，学生能更加深刻地理解基因工程各种理论知识，并能在实验过程中知道为什么要这样做，如何去做。
作者简介
韦宇拓，广西大学生命科学与技术学院微生物学副教授，博士，硕士生导师。主要从事基因工程菌的构建、生物产品的开发研究、蛋白酶分子进化、微生物生物技术等方面的教学和研究。
目录
第一章基因工程实验室基本要求和常规仪器设备
第一节实验室安全和基本环境要求
第二节实验室常规仪器和设备
第三节实验室灭菌、消毒技术
第二章核酸电泳技术
第一节核酸电泳的原理
第二节影响核酸电泳的因素
第三节核酸的检测方法
第四节核酸琼脂糖凝胶电泳
第五节聚丙烯酰胺凝胶电泳
第三章核酸工具酶
第一节限制性核酸内切酶
第二节连接酶
第三节DNA聚合酶
第四节DNA修饰酶
第五节核酸酶
第四章核酸的分离纯化
第一节核酸分离纯化的基本知识
第二节核酸分离纯化的基本原则
第五章PCR的原理和应用
第一节PCR技术的原理
第二节PCR反应系统
第三节PCR常规技术及其延伸技术
第四节实时荧光定量PCR
第六章基因工程常用载体
第一节基因工程载体的概述
第二节质粒载体
第三节λ噬菌体载体
第四节噬菌粒载体
第五节柯斯质粒载体
第七章目的基因的克隆
第一节目的基因的克隆策略
第二节基因组文库的构建
第三节cDNA文库的构建
第四节核酸探针的制备
第八章重组子的构建、转化和筛选
第一节连接方式
第二节重组子的构建策略
第三节重组子导入受体细胞
第四节重组子的筛选方法
第九章大肠杆菌表达系统
第一节基因表达系统概述
第二节大肠杆菌表达系统的主要表达元件
第三节常见的大肠杆菌表达系统
第四节外源基因在大肠杆菌中表达的主要影响因素
第十章酵母表达系统
第一节酵母表达系统的发展
第二节酵母的克隆载体类型
第三节酵母表达系统主要构成要素
第四节常用的酵母表达系统
第五节外源基因在酵母中表达的基本策略
主要参考文献
文摘
版权页：
插图：
有研究表明，大多数不稳定的重组外源蛋白是被大肠杆菌中的lon和clp基因编码的蛋白酶La和Ti降解的，其蛋白水解活性依赖于ATP。lon基因由热休克等环境压力激活，细胞内异常蛋白或重组外源蛋白的过量表达也可作为一种环境压力诱导lon基因的表达。lon基因缺失的大肠杆菌突变株可使原来半衰期较短的细菌调控蛋白（如SulA、RscA、λN等）稳定性大增，因此被广泛用作外源基因高效表达的菌株。此外，大肠杆菌中庞大的热休克蛋白家族对异常或异源蛋白的降解也有重要作用，其机理是它能胁迫异常或外源蛋白形成一种对蛋白酶识别和降解的有利空间构象，从而提高异常或外源蛋白对蛋白酶的敏感性。热休克基因dnaK、dnaJ、groEL、grpE以及环境压力特异性σ因子编码基因htpR缺失的突变株均呈现出对异源蛋白降解作用的严重缺陷，特别是lon—htpR—的双缺陷株，非常适合高效表达各种不稳定的重组外源蛋白。
| ISBN | 9787301282830 |
|---|---|
| 出版社 | 北京大学出版社 |
| 作者 | 韦宇拓 |
| 尺寸 | 16 |