植物组织培养实验指导 9787030322135

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《植物组织培养实验指导》适合于综合性大学、农林院校、高职院校等生物技术、生物科学、生物工程、农学、园艺、林学等生物相关专业的实验教材,也可供植物组织培养相关研究生、教师和科研人员参考。

目录

前言
实验一玻璃器具等的清洗、烘干、包扎、灭菌
实验二培养基母液的配制
实验三培养基的配制、灭菌及分装
实验四外植体表面消毒和接种
实验五愈伤组织的诱导与增殖
实验六外植体不定芽的分化
实验七常见植物离体快繁技术
实验八茎尖脱毒技术
实验九马铃薯试管微型薯的诱导
实验十成熟胚培养
实验十一花药培养
实验十二人工种子制作
实验十三植物细胞悬浮培养技术
实验十四植物细胞生长和活力的测定
实验十五细胞微室培养技术
实验十六原生质体的分离和培养
实验十七原生质体融合
实验十八植物水培技术
实验十九植物非试管快繁技术
实验二十农杆菌介导的植物遗传转化
实验二十一转基因植株基因组DNA的提取
实验二十二转基因植株PCR鉴定
附录一植物组织培养常用培养基配方
附录二常见水培营养液配方
附录三常见植物激素单位换算
附录四常见植物激素的配制和贮存
附录五常见抗生素的配制和贮存
主要参考文献

文摘

版权页:



插图:



(4)生根苗诱导
试管苗根长2 cm以上便可考虑移栽。将试管瓶苗移出培养室后,打开瓶盖炼苗1~2 d,然后洗净琼脂移栽到营养钵或直接在田园地里炼苗。营养钵基质为泥炭:珍珠岩=6:4,田园地以精耕细作表层添加营养基质即可。炼苗15~20 d便可定植。
(5)硝酸纤维素膜酶联免疫吸附(NCM—ELISA)检测法
样品制备:
称取0.1 g脱毒试管苗叶片放于灭菌的塑料袋内,加1 ml提取缓冲液研磨叶片,室温下静置塑料袋30~40 min,直到植物汁液渗出。
点样:
1)将一张干燥的滤纸放于实验台上,将膜放于其上。
2)用加样器吸取0.1 ml上清液,滴在膜上方格的正中,依次将各样品点于膜上。
3)将膜转到一张干燥的滤纸上,干燥15~30 min。
显色:
1)加30 ml封闭液于培养皿中,将硝化纤维素膜以45°角浸入其中(避免产生气泡),室温孵育60 min。取0.1 ml SPFMV抗体,在烧杯中与30 ml抗体缓冲液混匀,准备好第一抗体溶液。
2)弃去封闭液并用TBS迅速漂洗,然后加抗体溶液于培养皿中,加盖并用封口膜或胶带密封以防蒸发,室温孵育过夜。
3)弃去第一抗体液,在30 ml T— TBS中通过恒速振荡洗去未被结合的抗体,共洗4次,每次3 min。同时用30 ml酶标抗体缓冲液稀释0.05 ml GAR IgG—AP酶标抗体,准备好酶标抗体溶液。
4)弃去T—TBS,加入酶标抗体溶液,孵育1h。
ISBN9787030322135
出版社科学出版社
作者龚一富
尺寸5